近年来,越来越多的研究表明,特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者除有体液免疫异常外,都存在细胞免疫异常,发病与T淋巴细胞亚群、细胞因子表达及功能改变有密切联系[1]。为了观察T淋巴细胞免疫功能在ITP发病机制中的可能作用，我们使用BEACKMAN COULTER EPICS XL型流式细胞分析仪检测55例ITP病人的外周血T淋巴细胞（CD3+）及其亚群(CD4+, CD8+)的水平,并与30例正常人进行比较,以观察其在ITP发病中的变化和临床意义。

　　1  资料与方法

　　1.1  观察对象  ITP患者55例，男22例，女33例，年龄7～73岁，中位年龄36岁。诊断标准参照血液病诊断及疗效标准[2],正常对照组30例，男性12例，女性18例，年龄18～67岁,中位年龄38岁。

　　1.2  方法

　　1.2．1  抽取静脉血1ml于EDTA-K3抗凝管中，充分摇匀。

　　1.2．2  荧光标记  在测定管中加入荧光标记McAb(CD3-PECY5/CD4-FITC/CD8-PE)20μl,待测全血标本100μl，调节细胞浓度约10×109/L。每份标本设一同型对照，对照管中加入鼠抗人（IgG1-PECY5/IgG1-FITC/IgG1-PE）20μl，待测全血标本100μl，混匀，室温避光反应20min后，以Q-Prep仪溶血，上机检测。

　　1.2.3  仪器和试剂  荧光标记单克隆抗体：鼠抗人CD3- PECY5/CD4-FITC/CD8-PE三色标记和同型对照鼠抗人IgG1-PECY5/IgG1-FITC/IgG-PE均购自法国Immunotech公司。Beckman Coulter EPICS XL型流式细胞仪购自美国Beckman-Coulter公司。

　　1.3  统计学方法  所有数据经SPSS11.0统计软件处理，结果以均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用两样本均数t检验。

　　2  结果

　　ITP组与正常对照组T淋巴细胞亚群比较,结果见表1。

　　表1  ITP患者与正常对照组T淋巴细胞亚群的比值（略）

　　注:与正常对照组比较,*P<0. 01。

　　3  讨论

　　特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种自身免疫性疾病,由于体内产生了抗自身血小板的特异性抗体,导致血小板破坏增多而致外周血血小板减少。临床主要表现为出血,严重者例如颅内出血甚至危及生命。ITP的发病机制复杂多样:单核-巨噬细胞系统中体液免疫介导的血小板破坏增加、骨髓巨核细胞损伤或功能异常使血小板产生降低,细胞免疫功能异常在ITP发病机制方面均具有重要作用。越来越多的研究证实ITP患者体内存在着多种淋巴细胞异常,可能在ITP发病中起重要作用[3]。
   
　　研究资料表明,Th/Tc细胞的平衡在自身免疫性疾病的发生、发展过程中起重要作用[4]。CD4是T辅助/诱导细胞(Th/Ti)的表面标志,CD4+T细胞具有辅助T细胞转变成效应细胞、B细胞转化成浆细胞以及活化巨噬细胞等功能,起辅助、诱导细胞及体液免疫的作用。CD8是T抑制/杀伤细胞(Ts/Tc)的表面标志,CD8+T细胞具有细胞毒效应,它能抑制T细胞活化、抑制B细胞产生抗体,起抑制细胞及体液免疫的作用。Th细胞是机体免疫应答的中心细胞, CD4+/CD8+T(Th/Tc)比例变化反应机体的免疫功能状况,比例升高表明免疫功能亢进,比例降低表明免疫功能低下。
 
　　T淋巴细胞亚群之间保持正常的比例是形成正常免疫应答的基础,T淋巴细胞比例的失衡在自身免疫病的发生发展过程中也起重要作用[5]。本结果显示, ITP患者CD3+T淋巴细胞和CD3+CD4+ T淋巴细胞百分率明显下降, CD3+ＣＤ８＋ Ｔ细胞百分率升高，ＣＤ３＋ＣＤ４＋/CD3+CD8+比例降低，与对照组比较差异均有显著性（P＜0.01），提示T淋巴细胞亚群比例失衡, 免疫功能低下，与文献[6]报道一致。ITP患者外周血CD3+CD4+ T淋巴细胞减少的机制可能是CD3+CD4+ T淋巴细胞接受抗原提呈细胞提呈的自身抗原的刺激后活化,凋亡调节基因Fas的表达增加,易于发生活化诱导的细胞死亡而被清除。而外周血中CD3+CD8+ T淋巴细胞比例增高则可能是由于CD3+CD4+ T淋巴细胞减少, CD3+CD8+ T淋巴细胞反馈性升高所致。CD3+CD4+ T淋巴细胞的降低也可促进自身反应性B细胞的增殖,产生抗血小板抗体(PAIg),破坏血小板[7]。

　　ITP的具体发病机制,既存在淋巴细胞表型的异常,又有淋巴细胞功能的变化, T淋巴细胞亚群与ITP的发生、发展密切相关,因此动态观察外周血淋巴细胞亚群水平的变化对于了解ITP患者病情,判断疗效及预后均有一定意义。

【参考文献】
  　　［1］ Maurer A M,Liu Y,Caen J P,et al.Ex vivo expansion of megakaryocytic cells［J］. Int J Hematal,2000,71(3):203.

　　［2］ 张之南，沈梯.血液病诊断及疗效标准［M］.第2版.北京：科学出版社，1998,33~35.

　　［3］ Douglas B，Cines M D，Blanchette M B . Medicalprogress: immuethrombocyt-openic purpura［J］.N Engl J Med, 2002, 346(13):995~1008.

　　［4］ Haggqvist B, Hultman P.Effects of deviating the Th2-response inmurinemercury-induced autoimmunity towards aTh1-response［J］. Clin Exp Immunol, 2003,134: 202~209.

　　［5］ Haqqqvist B,Hultman P. Effects of deviating the TH2-response inmurine mercury-induced autoimmunity towards a TH1-respons［J］.Clin Exp Immuno,l 2003, 134(2): 202~209.

　　［6］ Yoshimura C, Nomura S, Nagahama M,et al. Plasma-soluble Fa(APO-1,CD95) and soluble Fas ligand in immune thrombocytope-nic purpura［J］.Eur J Haemato,l 2000, 64(4): 219~224.

　　［7］ Rathmell JC, Cooke M P, Ho W Y,et al.CD95(Fas)-dependen elimination of self-reactive B cells upon interaction with CD4+T cells[J].Nature, 1995, 376(6536):181~184.
                                                                                   

                                                                         文章来自：重症监护网