如何快速检出H1N1
时间：2010-08-23 10:34:24 来源： 作者：
| 4月末以来，一种新型甲型H1N1 流感病毒在世界范围内爆发流行。通过实验室对新型甲型H1N1流感病毒进行确认，对于病例管理、疾病的预防与控制，以及抗生素的合理应用均具有重要的意义。早期、快速发现感染者，可有效防止可能发生的疫情蔓延。 流感病毒是一种RNA病毒，根据核蛋白（NP）和基质蛋白（MP）不同，分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三种类型。根据膜糖蛋白血凝素（H）和神经氨酸酶（N）两种蛋白特性的差异，又可进一步分为多个亚型。目前，甲型流感病毒H有16个亚型，N有9个亚型。人类流感流行的主要致病亚型为人源甲型H1N1、H3N2、H1N2。 在电子显微镜下，流感病毒外表粗糙，具有多形性，多次传代后直径为80~120纳米。1纳米是1厘米的百万分之一，我们用肉眼根本不可能看到。那么，实验室是怎样在短短的几个小时内将流感病毒检测出来的呢？这就需要逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术。这种技术是诊断新型甲型H1N1流感病毒感染的最及时、有效的实验室检测方法。 聚合酶链反应（简称PCR）是上个世纪80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术，它能在一个试管内，将所要研究的目的基因或某一DNA片段，在数小时内扩增十万乃至百万倍，使肉眼能直接观察到，并进行判断。PCR技术不仅应用于临床医学，还广泛应用于法医学，这种技术能从犯罪嫌疑人留下的蛛丝马迹，比如一根毛发、一滴血甚至一个细胞中扩增出足量的DNA，供分析和鉴定，最终使嫌疑人伏法。 聚合酶链反应（PCR）的原理其实不复杂，它是利用DNA双链复制的原理，将DNA序列不断加以复制，使其数量以几何级数增加。 逆转录-聚合酶链反应 （RT-PCR）是用来扩增RNA的方法。因为流感病毒是RNA病毒，所以必须先经反转录酶的作用从 RNA反转录成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增。 用于甲型H1N1流感病毒核酸检测的样本可以是鼻拭子、鼻咽拭子、咽拭子、口腔含漱液、鼻咽或气管抽取物、痰等。实验室在接到患者样本后，首先进行病毒核酸的提取，然后进行RT-PCR检测，试验过程大约需要6~8小时。 这次甲型H1N1流感的爆发流行，对实验室检测能力是极大的考验。实验室不仅要具备病毒核酸检测相应的硬件设施，更需要具备高水准的实验技术人员，才能保证检测结果的快速与准确。 从2009年5月初开始甲型流感检测至今，北京朝阳医院感染科微生物室经历了考验。 为了保证尽快出结果，实验技术人员24小时值班进行病毒核酸检测，不仅没有休息时间，同时还要注意实验室的生物安全，人员防护，工作强度可想而知。但这个过程也是不断提高自己、磨炼自己的过程，因为强大的实验室检测能力是早发现、早报告、早诊断、早隔离、早治疗的技术保证。 |
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