Observation of the Efficacy of Haemonetics-5 Cell Saver System on Washing the Bacteria-Contaminated Blood.
田芳龄 岳云 杜小玲
Tian Fangling， Yue Yun， Du Xiaoling.Department of Anesthesiology，Beijing Red Cross Chaoyang Hospital， Affliatedof Capital university of Medical Science， Beijing 100020， China.


　　　　　　　　　　　　Abstract 
　Objective:　To observe the efficacy of Haemonetics-5 cell saver in washing the bacteria-contaminated blood.
　Methods:　Fifteen patients undergoing major surgery were choosen. The accumulative blood from the operation field was collected with the Cell Saver. After washing, 5 ml of the blood was taken to culture (sample Ⅰ), and 200～300 ml of the blood was taken to add with staphylococcus aureus, bacillus pyocyaneus and colon bacillus. Then the contaminated blood was washed with 1000 ml of normal saline (group Ⅰ)  and 1500 ml of normal saline (group Ⅱ) respectively, 5 ml of the washed blood (sample Ⅱ) was taken from each group to culture.
　Results:　The bacteriological cultures in sample Ⅰ were all negative with bateri. No staphylococcus aureus and bacillus pyocyaneus were seen after cultured in sample Ⅱ of group Ⅰ and group Ⅱ. But the colon bacillus was positive in sample Ⅱ of all the patients.
　Conclusion:　It seems impossible that all microorganisms are cleaned from the contaminated blood with Haemonetics-5 Cell Saver  and the washing efficacy can-not be improved by increasing the lotion volume.
　Key Words:　Cell Saver； Washing; Blood,contaminated; Bacteriological culture


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利用“红细胞回收仪”自体血回输技术可以解决同种异体输血引起的疾病传播、免疫机能下降以及血源不足等一系列难题，也是一种为抢救病人争取时间的有效措施。但是，利用红细胞回收仪处理被细菌污染的血液，其安全值得研究。本实验拟将红细胞回收仪回收的无菌血液，取样加入细菌变成污染血液，然后再用红细胞回收仪洗涤，通过细菌培养观察红细胞回收仪是否能将污染血液中的细菌清洗掉。今将观察结果报告如下，以供临床应用参考。
一、资料和方法
　　1、一般资料 
　　本文包括15例骨科、宫外孕、闭合性肝脾破裂三种无菌手术病人，术中出血量均在1000 ml以上。采用美国产“Haemonetics-5型红细胞回收仪”回收术野血液，经自动离心、洗涤后回收入储血罐，将大部分血液回输给病人。留取200～300 ml处理血液用作“实验用血”。
　　2、实验方法 
　　先从实验用血中取出血样5 ml，定为“血样Ⅰ”，注入细菌培养基；其余的血液加入0.5比色浓度2 ml的金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌，再加入0.9％生理盐水50 ml以使细菌与罐内的血液充分均匀混合，然后再次启动红细胞回收仪清洗血液，清洗液量分别预定为1000ml(定为Ⅰ组，n=10)和1500ml(定为Ⅱ组，n=5)。经过滤过、离心和洗涤后，收集红细胞悬液，取其中5 ml注入细菌培养基，定为“血样Ⅱ”。将血样Ⅰ和血样Ⅱ培养基随即送检验科行BACTEC 9240细菌学培养，细菌培养阳性的血样用法国梅里埃公司API试剂条码进行分离鉴定。

二、结果
　　1、所以病人血样Ⅰ的细菌培养结果均为阴性。
　　2、Ⅰ组血样Ⅱ经红细胞回收仪洗涤等处理后，金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌培养均为阴性，但有9例为大肠杆菌培养阳性，1例为沙门氏菌培养阳性(考虑系人为污染所致)。
　　3、Ⅱ组血样Ⅱ经红细胞回收仪洗涤处理后，金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌培养均为阴性，但大肠杆菌培养均为阳性。
三、  讨论
　　1、Haemonetics-5型红细胞回收仪属当前较为先进的自动化、计算机化自体血回输仪器，可及时回收手术野积血，进行自动采集、抗凝、离心和洗涤等过程，制成纯化的红细胞生理盐水悬液成品，其平均比积为0.5％，主要由存活的红细胞组成。据报道^[1]，清洗后纯化的红细胞生理盐水悬液中，肝素残余量＜2％，而游离血红蛋白、细胞碎屑以及激活的细胞和凝血因子的清除率可达到100％；此外，还可以完全清除羊水中的激活因子、组织因子以及羊水中的细胞及胎儿残留物^[2]。我科对几十例宫外孕手术病人采用红细胞回收仪行自体血回输，未发生DIC等并发症。
　　2、细菌的直径远远小于红细胞直径，因此，从理论上讲，离心洗涤过程是可以将细菌清除掉。但本实验结果显示，离心和洗涤不足以清除全部微生物，且在增加洗液量的措施下也并不能改进洗涤效果（指细菌培养阳性率下降）。文献资料说明，金黄色葡萄球菌的直径为0.8～1.0微米；绿脓杆菌直径为1.0～3.5×5.0微米，而大肠杆菌直径为1.1～5.5×6.0微米。大肠杆菌的体积大于金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌。至于金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌可以被红细胞回收仪清洗掉，而大肠杆菌不能被清洗掉，其原因是否与大肠杆菌直径大于金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌有关，尚不清楚。尽管红细胞回收仪对清除大肠杆菌的处理效果，但在我科使用红细胞回收仪自体输血已逾百余例中，不少系开放性腹部脏器损伤病例，回输洗涤后的浓缩红细胞液成品后，无一例发生脓毒血症。值得注意的是，这些病人都已全部接受预防性抗菌素治疗。因此，术中回收自体污染血液，是否应列为回输的相对禁忌症，尚有待于临床进行大量的血液细菌学培养等研究后方能确定。 <?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />

参考文献
1.  Vorweg M，Muckel G，Schindler A，Doehn M,et al. Heparin?induced coagulation disturbance from  mechanical autotransfusion. Anaesthesist 1998，47：12.〖ZK)〗
2.  Bernstein HH, Rosenblatt MA, Gettes M, et al. The ability of the Haemonetics 4 Cell Saver System to remove tissue factor from blood contaminated with amniotic fluid. Anesth Analg 1997,85:831～833.