Pharmacokinetics of Ｒopivacaine for Ｃombined Ｌumbar Ｐlexus-sciatic nerve Ｂlockade<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />

肖洁　王祥瑞　蔡美华　杭燕南　孙大金

Jie　XIAO,Xiangrui WANG ,Meihua CAI ,Dajin SUN .

Department of Anesthesiology, Renji Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200127 CHINA

Abstract

　　Objective：A RP-HPLC method for determination of ropivacaine in plasma was developed, and the pharmacokinetics of ropivacaine was investigated in combined lumbar plexus-sciatic nerve blockade.

　　Methods：8 patients undergoing lower-extremity surgery accepted combined lumbar plexus-sciatic nerve block, 0.375% ropivacaine 3mg/kg was injected. Blood samples were taken before the operation and at 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 90, 120, 180, 240, 360, 720 and 1440min after drug administration for determination of plasma ropivacaine concentration. Agilent Zorbax SB-C18（4.6×250mm，5μm）as a stationary phase and the pharmacokinetic parameters were calculated by 3P97.

　　Results：The linear range was from 10ng/ml ～8000ng/ml, the AUFS is 1ng/ml, and the pharmacokinetic parameters are Cmax₁3.09±0.89mg/l，Cmax₂3.84±1.58mg/l，t_1/2Kα7.56±4.65min，t_1/2β890.3±365.8min.

　　Conclusion：A RP-HPLC is a stable, simple and sensitive methord for determination of plasma ropivacaine concentration during combined lumbar plexus-sciatic never blockade.

Key Words：Ropivacaine; Combined lumbar plexus-sciatic nerve block; Pharmacokinetics

腰丛－坐骨神经阻滞有麻醉操作简单，对机体的影响小，麻醉后并发症少及术后镇痛时间长等特点，因此近几年来受到临床的广泛重视。罗比卡因作为一种新型长效的酰胺类局麻药，对中枢神经系统和心血管系统毒性低^[1]，已成为神经阻滞的常用药物，但神经阻滞时用药量大，甚至超过用药极限量。本研究旨在建立一种反相高效液相色谱分析法，用于测定腰丛－坐骨神经阻滞后盐酸罗比卡因的血药浓度，计算该药在人体内药代动力学参数，为临床安全用药提供参考。

　　资料与方法
　　仪器与试剂
　　仪器：Agilent 1100型HPLC（具真空脱气机、四元泵、恒温箱、自动进样器、可变波长检测器VWD及HP Chemstation化学工作站在线采集数据）

　　药品与试剂：盐酸罗比卡因（AstraZeneca, 产品批号：EC845），盐酸利多卡因（内标，产品批号：040202），乙腈、甲醇、n-氯丁烷（色谱纯）；其它试剂均为分析纯。
　　血药浓度测定

　　色谱条件 分析柱：Agilent Zorbax SB-C18，4.6×250mm，5μm（SN：USCL010807）预柱：Agilent Zorbax SB-C18，4.6×12.5mm，5μm（SN：USCI007343）。检测波长：210nm。流动相：乙腈：KH2PO4（0.01mol/L, pH 2.2）=33：67，流速：1.0 ml/min。柱温：30℃。

　　血浆样品的处理 取血浆1mL，加10μL内标溶液（盐酸利多卡因100μg/ml），加磷酸二氢钾（1mol/L）200μL涡旋混匀30s，加乙酸乙酯－n-氯丁烷（1：4）4mL，旋涡混匀3min，离心（3500rpm，10min）取上清液于另一尖底试管中，37℃氮气吹干，复溶于50μL流动相，取20μl进样作HPLC分析^[2] ，色谱图见图1a、1b、1c。<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />

　　药物干扰实验 取1mg/ml盐酸罗比卡因10μL，加入10μg/ml咪唑安定、利多卡因、曲马多、氯胺酮、氟哌利多、盐酸丁卡因、芬太尼、布比卡因、麻黄碱、阿托品、司考林、肝素钠、维库溴胺、丙泊酚后，保留时间无明显改变，且互不影响^[3]。

　　标准曲线与线性范围 取罗比卡因标准品（1mg/ml）分别制成10、50、100、500、1000、2000、4000、8000ng/ml浓度的血浆标准液，经上述血浆处理方法提取，进样分析得色谱图。以样品峰面积与内标利多卡因峰面积之比为应变量(Y)，以血浆中罗比卡因浓度为自变量(X)，得回归方程：Y=0.0018X+ 0.1135(r = 0.9997)，表明在血药浓度10 ～8000ng/ml范围内线性关系良好（图2）。仪器灵敏度AUFS为1ng。
　　提取回收率实验 配制含有内标物（利多卡因100 g/ml,10μL）的罗比卡因高、中、低浓度的标准系列溶液，按“标准曲线”项下操作，以提取后的色谱峰面积与未经提取直接进样获得的色谱峰面积之比及其均数之比，考察样品提取的绝对回收率和相对回收率。结果见表1。

　　精密度实验 分别配制罗比卡因高、中、低3种浓度的血浆样品（含内标）各5份，按“标准曲线”项下操作，连续测定3d，求算本方法的日内和日间精密度。见表2。
　　病例的选择与麻醉方法 随机选择ASAⅠ～Ⅱ级择期单下肢手术病人8例，女3例，男5例，年龄26～48(36.7±9.1)岁，体重60～80（70.4±8.4）kg。入手术室后常规鼻导管吸氧，行BP、ECG、SpO₂监测，开放左肘正中静脉。采用神经刺激定位仪和100mm穿刺针行后路腰神经丛和坐骨神经阻滞。局麻药为0.375%盐酸罗比卡因,总剂量为3mg/kg，两处神经阻滞给药量相等。给药，给药过程中注意严格回抽，防止局麻药入血。神经定位和给药操作在4～5min内完成。分别在给药前及给药结束后5、10、15、20、25、30、40、50、60、90、120、180、240、360、720、1440h采取静脉血3ml，离心（3500r/min）15min，分离血浆，于-20℃冷冻保存至测定。按“2.2血浆样品的处理”项下操作。测定病人血浆中的盐酸罗比卡因的浓度。

　　结果
　　药代动力学研究 血药浓度数据用中国药理学会药理专业委员会编制的3P97药代动力学程序进行动力学参数的模拟，药代动力学特征符合二室模型。药动学参数结果见表3，平均药时－曲线见图3。<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />

　　讨论
　　腰丛－坐骨神经阻滞有麻醉操作简单，对机体的影响小，麻醉后并发症少及术后镇痛时间长等特点，因此，在老年、心血管疾患、低血容量等病人，外周神经阻滞是一种理想的麻醉方法。

　　罗比卡因作为一种新型长效的酰胺类局麻药，具有起效快、作用时间长、麻醉作用确切、有对中枢神经系统和心血管系统毒性低等优点。是目前临床上较理想的用于区域阻滞麻醉和硬膜外麻醉的长效局麻药。文献研究表明该药主要通过肝脏代谢^[4]，本研究为保证结果的准确性，在选择临床病例时，排除了有心肺疾患或肝肾功能不全的病例。
　　研究结果表明，盐酸罗比卡因血药浓度在10－8000ng/ml范围内有良好的线性关系(r = 0.9997)。罗比卡因在人体过程符合的药代动力学二室模型。该方法灵敏度高、线性范围大、操作简便、专一性好、可用于临床盐酸罗比卡因血药浓度的监测。

　　罗比卡因硬膜外阻滞药代动力学已有报导^[5]，但该药用于神经阻滞的药代动力学研究却未见报道。腰丛－坐骨神经阻滞的麻醉操作特点是两次给药，本实验在实验设计阶段就预期到这种特殊的给药方法将为后期的药代动力学数据的处理带来一定的麻烦，因此为减少误差，我们对药物的用法和用量进行了严格的要求，所有病例的操作部分也都经过严格的筛选，保证神经定位和给药操作在4～5min内完成。尽管如此，所有病人的血药浓度－时间曲线均成双峰形，因此在药代动力学统计上我们分别计算了两次达峰的达峰时间和峰浓度，以及达峰前的吸收半衰期和达峰后的清除半衰期，并计算了曲线下面积。从药代动力学参数上，可以发现罗比卡因腰丛－坐骨神经阻滞与硬膜外麻醉相比，前者的血药峰值明显高于后者，消除半衰期也较长^[5]。这可能与罗比卡因的浓度和剂量有关，这也可以用来解释为什么临床上外周神经阻滞的术后镇痛时间较硬膜外麻醉的术后镇痛时间长。
　　总之，腰丛－坐骨神经阻滞麻醉后，用反相高效液相色谱法行血浆罗比卡因的浓度的测定，方法稳定、简便、灵敏度高，适用于该药在此种条件下的药代动力学研究。
　　参考文献
　　1.Ekatodramis G, Borgeat A, Huledal G, et al. Continuous interscalene analgesia with ropivacaine 2 mg/ml after major shoulder surgery. Anesthesiology, 2003, 98: 143-150.
　　2.Reif S, Le Corre P, Dollo G, et al. High-performance liquid chromatographic determination of ropivacaine,
　　3-hydroxy-ropivacaine, 4-hydroxy-ropivacaine and 2’,6’-pipecoloxylidide in plasma. J Chromatogr B Biomed Sci Appl, 1998, 719: 239-244.
　　3.王祥瑞，杭燕南，孙大金．连硬阻滞和全麻病人异丙酚的血药浓度测定．临床麻醉学杂志,1998,14：74.
　　4.Pere P, Salonen M, Jokinen M, et al. Pharmacokinetics of ropivacaine in uremic and nonuremic patients after axillary brachial plexus block. Anesth Analg, 2003, 96: 563-569.
　　5.Burm AG, Stienstra R, Brouwer RP, et al. Epidural infusion of ropivacaine for postoperative analgesia after major orthopedic surgery: pharmacokinetic evaluation. Anesthesiology, 2000, 93: 395-403.<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />