<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /> 田素明1,宋文阁2,傅志俭2,赵松云2,马玲2,赵序利2 1石河子大学医学院第一医院麻醉科;2山东省立医院疼痛科 观察不同浓度的胶原酶在体外对椎间盘的溶解作用,现报告如下: 材料和方法 注射用胶原酶为中国上海侨源生物制药公司生产,1200U/支,冻干粉剂,用生理盐水溶解后使用,椎间盘为随机选取的山东省立医院、山东大学齐鲁医院和山东中医药大学附属医院手术切除的椎间盘36份。其中男性患者椎间盘23份,女性13份,平均年龄(40土11)岁,病程(58士40)d,重量(1.8士0.9)g从36份椎间盘中随机抽取5份重量在1.0g以上的椎间盘,将每份标本中的纯椎间盘组织分为0.25 g/份的三等份(均含有髓核及纤维环),将来自同一椎间盘的3份样本随机置于3个试管中,分别标记为CI,DI和EI,C工加人300U/ml的胶原酶溶液0.5 ml中,DI加人75 U/ml的胶原酶溶液0.5ml,E工加人生理盐水0.5ml,以上胶原酶溶液和生理盐水中均含0.1mol/L CaCl,余4份间盘的分组方法同上,共组成5个配对,每个对子为来自同一椎间盘的3份样本。将试管密封,置于37?C恒温箱中,于加人胶原酶即刻、6 h,12h,24 h,48 h,72 h,96 h,120 h测定试管内pH值和观察试管内容物的变化。统计学处理:以x土s表示,采用方差分析,p< 0.05为差异有显著性。 结 果 1. 试管内椎间盘的变化75U /ml和300U /ml胶原酶溶液加人试管后24 h椎间盘组织发生明显溶解,椎间盘组织逐渐变成泥沙状物沉于试管底部,72 h以后变化不明显,120 h加人0.5 ml生理盐水并振荡试管,可见试管内容物变成均质混悬液。C,D两组的椎间盘组织均完全溶解。C组(生理盐水组)试管内容物仅见肿胀和轻度自溶。 2. 试管内pH值变化即刻:7.00土0.20,24h:6.80士0.5,48h:6.50土0.25,72h:6.20士0.18,96h:6.00士0.10,120h:5.50士0.26。随时间延长pH值逐渐降低。 讨 论 75 U/L300U/L胶原酶溶液在溶盘时,其溶解变化是同步的。根据米曼氏方程,当酶的数量大于底物的数量时,不同浓度的酶所催化的反应速度是无差别的[1]。实验所选椎间盘块较小(0.25 g/块),而胶原酶的量可能大于完全溶解所需剂量,因此导致浓度对酶促反应的影响被抵消。 纤维环与髓核均被溶解,似与以往胶原酶仅能对纤维环内层有轻微溶解的结论相矛盾。从理论上说,I、II型胶原占纤维环干重的50%~70%,只要条件合适,胶原酶应能溶解纤维环中的胶原,可能是因为以往的研究均是建立在盘内注射的基础上,胶原酶被局限于髓核中,极少和纤维环接触,故只能对纤维环内层有轻微的溶解作用。本研究似乎可以解释为什么盘外注射也能取得良好的治疗效果,将为盘外注射溶盘提供有力的理论支持。 |