Objective:To study the dynamic changes and clinical singniticance of interleukin-6(IL-6) and interleukin-8(IL-8) inserum of patients with acute myocardial infarction(AMI).
Methods:Asynchronous serum IL-6 and IL-8 concentrations measured with radioimmunological assay in 30 patientswith AMI from symptoms onset to thromblytic therapy finished and the dataswere compard with 20 members ofa healthy controlgroup,to investigate the relationship between the changes and myocardial ischemia/reperfusion.
Results:The serum concentrations of IL-6 and IL-8 were elevated in all patients with AMI when compared with the healthy control group (P<0.001),especially increasedsignificantly in patients after thrombolytic therapy with reperfusion (P<0.05),and the levels of IL-6 and IL-8 were found to be significantly higher in patientswith complicated AMI than in patientswith uncomplicated AMI (P<0.05).
Conclusion:Changes of IL-6 and IL-8 in serumof the patients with AMI were shown to be contributed to evaluate the severity of AMI and the effects of thromblytic therapy.
[Key words]　Acute myocardial infarction;Interleukin-6;Interleukin-8

        早期溶栓治疗是目前临床上急性心肌梗死(AMI)救治的最重要的方法之一,大量相关研究已证明溶栓可有效恢复闭塞冠状动脉的再灌注,缩小心肌梗死范围,改善心功能,降低死亡率。但与此同时所引起的缺血-再灌注损伤也引起了临床的广泛重视。随着对细胞因子与缺血-再灌注损伤关系的研究,已有观察者注意到AMI再灌注后可引起IL-6及IL-8的升高[1-3],但对其与病情严重程度及对溶栓治疗指导意义的研究尚不深入。故本课题组采用放射免疫分析方法对30例AMI患者血清中IL-6、IL-8进行了测定,并对其动态变化与再通与否的关系
及对溶栓治疗的指导意义进行探讨。
1 材料与方法
1.1　研究对象及分组　1999年1月~2000年3月收入我科符合静脉溶栓指征的AMI患者
30例,其中男22例,女8例,年龄31~70岁,于发病后6小时内(平均3.11±1.29小时)给予尿激酶(天普洛欣)100万U加速静脉溶栓。根据闭塞血管再通标准[4]将患者分为溶栓再通组和溶栓未再通组;其中溶栓再通组18例,平均年龄54.18±9.83岁;溶栓未再通组12例,平均年龄56.61±7.42岁。于溶栓前、溶栓后4、8、12、16、24、48及120小时分别采静脉血3 ml,离心分离血清测其IL-6、IL-8水平。对照组为20名健康体检者,年龄性别与实验组无明显差别。

1.2　血清IL-6、IL-8测定　均采用放射免疫分析法,具体方法见文献[5];放免试剂盒由军事医学科学院东亚免疫技术研究所提供。
1.3　统计学处理　检测结果以x±s表示,组间比较采用t检验。

2　结果
2.1　AMI患者血清IL-6、IL-8水平分析　对30例AMI患者入院后即刻的血清IL-6、IL-8水平进行了检测,结果表明,30例AMI患者的IL-6、IL-8平均水平明显高于健康对照组(P<0.001),见表1。
2.2　AMI溶栓再通、未通患者IL-6、IL-8动态变化的比较　无论溶栓再通与否,所有AMI患者的IL-6于发病后即已升高;其中溶栓治疗再通组高峰在治疗后12小时,未再通组高峰则在24小时。高峰过后IL-6水平逐渐下降,但5天后仍高于溶栓治疗前水平。另外,所有AMI患者于入院时IL-8也均已升高,溶栓治疗再通组高峰出现在治疗后4小时,未再通组则出现在8小时。高峰过后,两组IL-8水平均恢复较快,24小时后即已低于溶栓治疗前水平,见图1。
2.3　伴有并发症的AMI患者与不伴有并发症患者的IL-6、IL-8水平比较　本组病例中,合并心源性休克、急性心衰、严重心律失常的11例患者与未出现并发症的患者相比较,IL-6、IL-8水平均明显增高(P<0.05),见表2。

3　讨论
        近年来随着对AMI溶栓治疗的普及及介入性治疗、冠脉搭桥术的广泛开展,挽救缺血及濒临死亡的心肌,使闭塞的血管再通成为可能和现实,然而治疗过程中缺血-再灌注损伤又成为困扰临床疗效的重要问题,对其发生机制的相关研究也成为目前临床的热点之一。
本研究结果提示,AMI发生后无论溶栓再通与否,血清IL-8水平均升高,但溶栓再通组升高较快。由此表明在AMI发生发展的早期由于心肌严重的缺血、缺氧造成细胞代谢障碍及细胞膜通透性改变所形成的炎性反应可能促成了缺血、坏死心肌内单核/巨噬细胞分泌IL-8。IL-8的主要生物活性是对中性粒细胞有强烈的选择性趋化作用,使其定向游走到炎症的反应部位,而且这种趋化力高于已知的C5a、白细胞三烯B4等趋化因子。另外IL-8可以促进粒细胞穿越毛细血管内皮细胞层[6],并促进粒细胞变形、脱颗粒,氧自由基和组胺大量释放及使花生
四烯酸代谢产物增加,引起心肌组织局部的炎性反应,诱导细胞内Ca2+快速升高,从而引发细胞内Ca2+超载及细胞损伤,因此有人认为IL-8通过定向趋化作用介导粒细胞在AMI组织损伤中发挥着一定的作用。
        本试验还显示AMI患者的IL-6水平较健康对照组明显升高,而且随缺血-再灌注时间的顺延IL-6呈现逐渐增高趋势,说明AMI的发生及缺血后溶栓再灌注促进了机体IL-6的分泌。IL-6可促进心肌细胞间黏附分子-1(ICAM-1) mRNA的表达,进而引起ICAM-1合成、表达成倍增加。ICAM-1的配体LFA-1(CD11/CD18)分布在中性粒细胞表面,这一对黏附分子的结合促进了心肌血管内皮细胞与中性粒细胞的黏附,继而中性粒细胞释放超氧阴离子、穿孔素及抑制内皮细胞合成、释放NO等细胞毒物质引起或加重心肌细胞损伤[7]。另外IL-6可以促进诱导型NO合成酶增加,使心肌环磷酸鸟苷(cGMP)水平升高,钙内流减少;并且还可以抑制对β-肾上腺素能刺激,降低心肌细胞环磷酸腺苷(cAMP)水平,造成心肌损伤[8]。
       另外,本试验结果还提示,溶栓再通组IL-6、IL-8水平明显高于溶栓未再通组,且高峰前移,峰值水平亦明显增高。国内外亦有再灌注引起IL-6[1]及IL-8水平增高[2,3]的报告,并认为缺血-再灌注心肌内IL-6及IL-8的释放与中性粒细胞活化致内皮细胞损伤相关。当心肌缺血-再灌注时,使大量的中性粒细胞随再通血流进入冠脉,郁滞于微循环并向心肌转移,同时也容易造成毛细血管嵌顿或堵塞形成无再流现象。由于中性粒细胞的聚集、活化、黏附、释放细胞毒产物引起心肌细胞的进一步炎性反应及坏死,从而导致“再灌注损伤”的发生。Kukielka等[3]研究证明再灌注是诱导缺血心肌IL-8 mRNA表达的必要条件,继尔IL-8进一步介导了再灌注后的心肌炎症反应。本研究有并发症的AMI患者血清中IL-6、IL-8水平均较无并发症者明显升高,亦说明IL-6、IL-8的血清水平与缺血-再灌注损伤相平行。
        通过本研究我们认为IL-6、IL-8表达与AMI早期冠脉血管闭塞相关,并与再灌注后的冠脉血管再通相关;IL-6、IL-8的峰值水平与出现时间可能提示临床的溶栓效果,而当其过量表达则可能提示再灌注后的过度炎性反应,并由此而造成临床并发症发生率较高,所以在AMI的发生发展及缺血-再灌注治疗过程中IL-6、IL-8等细胞因子可能参与了AMI初始的心肌损伤及溶栓治疗后的再灌注损伤,且与临床病情程度密切相关。因此,探索IL-6、IL-8与AMI的关系,将有助于进一步阐明缺血-再灌注及再灌注损伤的机制,为临床防治提供新的依据和思维方法。
4　参考文献
1　丁文惠,吴付轩,李大元et al.心肌梗塞再灌注中血浆白细胞介素6的动态变化和其单克隆抗体的保护效应[J].中华心血管杂志,1999;27(1):29.
2　Neuman F J,Ott I,Gawaz Met al.Cardiac release of cytokines and inflammatory responses of acute myocardial infarction [J]. Circulation,1995;92:748.
3　Kukielka G L,Smith C W,Larosa G Jet al.Interleukin-8 gene induction in teh myocardium after ischemia and reperfusion in vivo [J].J Clin Invest,1995;94:09.
4　中华心血管病杂志编辑委员会.急性心肌梗塞溶栓疗法参考方案[J].中华心血管病杂志,1996;24:328-329.
5　Johason K.The proinflammatory cytokine response to coagulation and endotoxin in whole blood [J].Blood,1996;87:5051-5060.
6　Smith W B,Gamble J R,Clark-Lewis Iet al.Interleukin-8 induces neutrophil transendothelial migration [J].Immunol,1991;72:65.
7　Pudil R,Pidrman V,Krejsek Jet al.Cytokines and adhesion molecules in the course of acute myocardial infarction [J].Clin Clim Acta,1999;280(1-2):127-134.
8　傅　广,赵小平.心力衰竭患者TNFα和IL-6的变化及氯沙坦的影响[J].中国循环杂志,2001;16(4):243-245.