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血液回收对红细胞ATP 含量及葡萄糖 6-磷酸脱氢酶活性的影响

时间:2010-08-24 09:10:17  来源:  作者:

        术中自体血液回收是解决血源紧张的措施之一,也是防止血源性传染病的一条途径[1 ,2 ] ,目前广泛应用于外科手术中,回收红细胞的质量和利用率直接影响着自体输血的质量。笔者通过测定术野红细胞及相应的经血液回收机处理的浓缩红细胞腺苷三磷酸(ATP) 含量及葡萄糖 6-磷酸脱氢酶( G-6-PD) 活性,并与库存红细胞比较以了解术中洗涤式血液回收对红细胞的影响。
        1  材料与方法 
        1. 1  一般资料 选择拟在全麻下且估计术中出血量>600ml 的心血管外科择期手术患者50 名,美国麻醉医师协会(ASA) Ⅱ~ Ⅲ级,男性35 例,女性15 例,年龄18~70 岁, 体重50~75 kg ,所有患者肝肾功能正常,无血液性、内分泌及自身免疫性疾病,近期未服用影响红细胞功能的药物,未行放射治疗、化学治疗。急性感染创伤;血液中混有脓液、胆汁、癌细胞的情况被列为回收禁忌。
        1. 2  麻醉及术中自体血液回收 所有患者进入手术室后开始监测动脉压、心电图、脉搏血氧饱和度、呼气末CO2 分压,全麻诱导用药为芬太尼、依托咪酯、琥珀胆碱;以芬太尼、异丙酚、异氟醚与维库溴安维持全麻。术中出血用自体-2000
型血液回收机(北京京精医疗有限公司) 通过连接在采血管道上的抗凝药注入管,使抗凝药与回收血液混合,选用抗凝剂为50IU/ ml 的肝素盐水,滴入体积与吸入血体积之比为1 ∶4~1 ∶5 ,血液在储血器内经多层过滤(过滤网眼直径为20~40μm) ,进入血液回收罐内经分离[ 泵速(300~500) r/min] 、清洗、排空处理以去除细胞碎片、游离的血红蛋白及抗凝剂等物质,最后得压积为30 %~50 %的浓缩红细胞。
        1. 3  样本的采集及测定 取患者术野血(术野组) 及经血液回收机处理的浓缩红细胞(回收组) 各6ml ,另取50 份以CPDA 为保养液库存两周的异体红细胞悬液(库存组) 6ml ,分别测定其红细胞ATP 含量及G-6-PD 活性。红细胞ATP含量用双酶法[3 ] 测定;红细胞G-6-PD 活性用G-6-PD 试剂盒(南京建成生物工程研究所) 测定,具体方法参照说明书。
        1. 4  统计学分析 计量资料以 ±s 表示,实验数据用SAS6. 12 版软件行统计学处理,自身对照采用配对t 检验,组间比较行单因素方差分析。
          2  结果(表1)

1  各组红细胞ATP 含量与G-6-PD 活性的比较( n = 50 ,  ±s)

 

术野组

回收组

库存组

ATP (nmol/ g Hb)

4749 ±282

3093 ±127

3026 ±143

G-6-PD( %)

93. 9 ±2. 7

81. 7 ±1. 9

80. 7 ±2. 3


注:术野组与回收组比较:ATP : t = 18. 798 ,G-6-PD : t = 20. 210 , P < 0. 01; 术野组与库存组比较:ATP : t = 14. 477 ,G-6-PD : t = 21. 326 , P < 0. 01 ; 回收组与库存组比较:ATP : t = 1. 479 ,G-6-PD : t = 2. 506 , P > 0. 05 
        3  讨论 
        本研究结果表明洗涤式血液回收全程处理及血液保存均可使红细胞ATP 含量减少,使红细胞G-6-PD 活性降低。王卓强等[4 ]有类似报道。血液回收全程处理致红细胞G-6-PD 活性下降、ATP 含量减少的原因可能与自体血回收过程中红细胞与管道和回收装置表面接触,气血界面损伤,负压吸引,泵管挤压,高速离心及其他一些因素如血浆中变性蛋白、氧自由基、血小板和白细胞激活产物等造成红细胞膜破坏有关,红细胞膜结构发生改变,钙离子流入细胞内造成钙超载,最终导致红细胞能量代谢障碍及磷脂酶、蛋白酶对红细胞膜结构本身的破坏[6 ,7 ] 。
        本研究还发现回收与库存红细胞ATP 含量及G-6-PD活性无明显差异, 与以前的研究结果不尽相同, Schmidt 等[8 ] 研究发现,回收红细胞的ATP 含量高于库存红细胞,但他们是与库存3 周或4 周且保养液为氯化钠-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇(SAGM) 的异体血做对比。同时还可能与所运用的血液回收机不同有关,Serrick 等[9 ] 用5 种不同型号的血液回收机进行术中的血液回收,回收的红细胞的质量有很大的差别。虽然血液回收安全性和使用已得到了大家的公认,但血液回收全程处理会对红细胞的生化特性造成一定的影响,同时致生化特性改变的因素还有待进一步深入研究。一般认为红细胞ATP 含量< 1. 5μmol/ gHb 才是致命的,可使红细胞的功能明显降低。本研究中回收和库存红细胞ATP含量均远高于上述临界值;同时回收和库存红细胞G-6-PD活性也均在正常值范围,因此可认为回收和库存红细胞在形态和功能上不应受到明显的影响。鉴于异体输血所引起的各种并发症明显增多,自体血液回收是血液保护的重要措施,应作为术中优先采用的输血方式。
参考文献
1  Avall A , Hyllner M , Bengt son J P , et al . Postoperative inflammatory response after autologous and allogeneic blood t ransfusion[J ] . Anest hesiology ,1997 ,87 (3) :511
2  Schreiber GB , Busch MP , Rleinman SH , et al . The risk of transfusion transmiteed vital infections[J ] . N Engl J Med ,1996 ,334 (26) : 1685
3  吴梓梁. 红细胞酶病检测方法与应用. 见:李宗增, 王鸿利, 韩忠相主编. 血液实验学[M] . 上海科技出版社,1997 ,202~203
4  王卓强,陈绪贵,刘 军. 自体血液回收技术对红细胞膜ATP 酶的影响[J ] . 临床麻醉学杂志,2003 ,19 (9) :537
5  Dern RJ , Brewer GJ , Wiorkowski J G. Studies on t he preservation of human blood. II. The relatonship of eryt hrocyte adenosine t riphosphate levels and ot her in vit ro measures of red cell storage ability[J ] . J Lab Clin Med , 1967 ,69 (6) : 968
6  Halperin J , Brugnara C , Tosteson MT , et al . Voltage-activated caution t ransport in human eryt hrocytes [ J ] . Am J Physiol , 1989 ,257 (5) : C986
7  Sebastian C , Romero R , Ferrer C , et al . Postoperative blood salvage and refusion in spinal surgery : bood quality , effectiveness and impact on patient blood parameters [ J ] . Eur Spine J , 2000 , 9 (6) : 458
8  Schmidt H , Kongsgaard UE , Geiran O , et al . Autot ransfusion after open heart surgery : quality of shed mediastinal blood compared to banked blood [ J ] . Acta Anaest hesiol Scand , 1995 , 39 (8) : 1062
9  Serrick CJ , Scholz M , Melo A , et al . Quality of red blood cells using autot ransfusion devices : acomparative analysis [J ] . J Extra Corpor Technol , 2003 ,35 (1) :28

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