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NMDA受体2B亚基抗原表位的免疫学活性及镇痛效应

时间:2010-08-23 14:32:58  来源:  作者:

       方法 将携带NR2B亚基抗原模拟表位的特异性噬菌体克隆扩增,并进行滴度测定。选择成年雄性SD大鼠25只,体重为200250g/只,随机分为5组,每组5只,分别为单纯免疫组、免疫疼痛组、噬菌体对照组、单纯SNI组、正常对照组。单纯免疫组、免疫疼痛组大鼠分别于0,1,2w时皮下两点注射滴度为41010 pfu的特异性噬菌体克隆,免疫疼痛组于首次免疫后1w时行保留性神经损伤(spared nerve injury,SNI)术。噬菌体对照组大鼠于相应时间注射相同滴度的无关噬菌体并于首次注射后1w时行SNI术,单纯SNI组不做免疫处理仅行SNI术,正常对照组为未作任何处理的正常大鼠。SNI术前1d ,术后1d,1w,2w,3w时测定免疫疼痛组 ,噬菌体对照组,单纯SNI组大鼠术侧后足触诱发痛的缩足反应阈值(g)。首次免疫后第4w处死大鼠采集血液分离血清,用间接ELISA法检测血清中特异性抗NR2B的抗体、噬菌体抗体。

       结果   免疫疼痛组、噬菌体对照组、单纯SNI组大鼠缩足阈均于术后1d降低(P <0.05)。免疫疼痛组术后1w时缩足阈开始回升,术后2w时明显回升,与噬菌体对照组、单纯SNI组比较有差异(P <0.05),术后3w时基本回到术前水平,而噬菌体对照组、单纯SNI组缩足阈降低持续至术后3w。单纯免疫组,免疫疼痛组均产生了特异性NR2B抗体,正常对照组大鼠血清中未检测到特异性NR2B抗体(P <0.05)。单纯免疫组、免疫疼痛组、对照组大鼠均产生了噬菌体抗体,正常对照组大鼠血清中未检测到噬菌体抗(P<0.05) 。   

       结论   从噬菌体肽库筛选获得的NR2B的模拟抗原表位具有免疫学活性,能诱导SD大鼠产生特异性NR2B的抗体,并有一定的镇痛作用。

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