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辅助性腺病毒的构建及鉴定
时间：2010-08-23 14:33:39 来源： 作者：
| 随着细胞分子生物学的发展和基因工程技术的日臻完善，基因治疗作为一项新的生物干预手段，已被广泛应用于多种疾病的治疗与研究。正是由于对慢性疼痛的分子生物学机制有了更加深入的了解，人们才有可能在基因水平上探讨其治疗，通过上调抗痛基因和下调致痛基因的表达为疼痛的治疗开辟一条新的途径。基因治疗已被成功地应用于多种慢性疼痛动物模型的试验性治疗中。 控制慢性疼痛的基因治疗研究日益热门，但如何选择安全的载体把治疗基因有效的输送到正确的部位仍然是一大难题；目的基因表达的靶向性、稳定性等基因治疗中的关键问题也与载体的选择和改造密切相关。 基因治疗过去十年的发展主要是针对治疗的策略，测试及改进转运载体和调控系统，以使导入的基因能在安全的前提下发挥最大的效能。大量研究表明，腺病毒载体的安全性比较好，同时还具有宿主范围广、病毒滴度高、易于制备、感染性强等特点，在应用于慢性疼痛的基因治疗时有其独特的优势，特别是第三代腺病毒载体（复制依赖性腺病毒载体）的炎症反应和细胞免疫反应进一步减轻，毒性反应进一步降低，转基因表达时间明显延长。基于此，本研究将应用基因重组技术分别构建第三代腺病毒载体生产系统中的两种辅助病毒以及一个表达Cre重组酶的真核表达载体，并在转染HEK293细胞后验证Cre/loxP系统在腺病毒生产系统中应用的有效性，为第三代腺病毒载体的生产和在慢性疼痛的基因治疗中的应用提供实验资料和依据。 |
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