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目的: 通过应用荧光双标技术观察骨癌痛模型大鼠脊髓p38ɑ和p38β的细胞定位,探讨其在神经细胞和胶质细胞上空间定位。 方法: 选择雌性SD大鼠20只,随机分为2组(n=10):A组(对照组):左侧胫骨上段骨髓腔注入3 μL Hank液; B组(模型组): 左侧胫骨上段骨髓腔注入3 μL MADB-106大鼠乳腺癌细胞(4.8×109 L-1)。第14天,采用免疫组织化学方法和荧光双标法观察骨癌痛模型大鼠患侧腰段脊髓p38ɑ和p38β免疫反应阳性产物的变化和细胞定位。 结果: 左侧胫骨上段骨髓腔注入癌细胞后第14天, 骨癌痛模型大鼠患侧脊髓p38ɑ和p38β表达明显增加;模型组大鼠腰脊髓背角p38ɑ免疫反应光密度值(68.05±2.03)比对照组(40.63±1.06)明显增加,可达67%,差异有显著性意义( P<0.05);脊髓背角p38β免疫反应光密度值(56.04±2.08)明显高于对照组(30.15±2.05),可达86%,差异有显著性(P<0.05);荧光免疫组化双标显示患侧脊髓p38ɑ与神经元标志物NeuN有共表达,p38β与小胶质细胞标志物OX-42有共表达。 结论: 脊髓p38ɑ和p38β参与了骨癌痛的发生和发展, p38α主要在脊髓神经元表达, 而p38β则在小胶质细胞中表达。 |
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