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结扎冠状动脉诱发P物质在大鼠心肌组织、背根神经节和脊髓内的表达变化

时间:2010-08-23 14:33:49  来源:  作者:
       方法: 实验分两部分进行。
       第一部分:实验选用雄性SD大鼠随机分为三组:(1)动物对照组(Control group, C组),麻醉后直接取材;(2)手术对照组(Sham group, S组),只开胸不结扎冠脉;(3)结扎冠状动脉组(Coronary artery occlusion group, CAO组),单纯扎闭冠状动脉左前降支。其中,Sham组和CAO组又分为八个时点的亚组:0.5h组、1h组、3h组、6h组、1day 组、2day组、3day组、7day组。采用免疫组化和ELISA技术从蛋白水平观察结扎大鼠冠状动脉不同时点心肌、脊髓及背根神经节SP的表达变化;
       第二部分: 根据第一部分实验结果,分别选取CAO后SP表达最强的时点。随机分为三组:(1)动物对照组(Control group, C组);(2)手术对照组(Sham group, S组);(3)结扎冠状动脉组(Coronary artery occlusion group, CAO组);采用免疫组化、ELISA和Real Time RT-PCR技术从蛋白和基因水平观察结扎大鼠冠状动脉不同时点心肌、脊髓及背根神经节SP和SP mRNA的表达变化。
       结果: (1)CAO后SP在缺血区心肌和非缺血区心肌内的表达水平均较对照组显著升高(P<0.05),在CAO3h达高峰(P<0.05);且CAO各组缺血区心肌SP的表达水平均较相应组非缺血区心肌SP的表达水平显著升高(P<0.05);(2)CAO后各时点大鼠背根神经节SP水平较对照组显著升高,在CAO3h达高峰;(3)CAO后各时点大鼠脊髓SP水平较对照组显著升高,在CAO3h达高峰;且背侧脊髓SP水平较腹侧脊髓SP水平显著升高(P<0.05)。(4)在心肌组织(包括缺血区心肌和非缺血区心肌)和背根神经节,CAO后SP mRNA的表达水平均较对照组显著升高(P<0.05),与蛋白水平变化一致;但在脊髓,CAO后SP mRNA的表达水平与对照组比较无显著性差异。
       结论: 结扎冠状动脉可诱发大鼠心肌(包括缺血区和非缺血区心肌)、背根神经节及脊髓SP和SP mRNA水平明显升高,提示:急性心肌缺血作为一种伤害性刺激可能诱发、激活了机体神经源性反应机制;SP可能在这种神经源性机制中发挥了作用;神经源性机制可能参与了急性心肌缺血伤害性刺激诱发的心肌损伤及其调制的病理学过程。
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