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慢性神经病理性痛大鼠鞘内移植人前脑啡肽原基因修饰永生化大鼠神经前体细胞的镇痛效应
时间：2010-08-23 14:34:02 来源： 作者：
| 方法： 成年雌性Wistar大鼠40只，随机分为五组：Naïve组，大鼠不进行任何处理；Sham组，大鼠仅暴露右侧坐骨神经分支；SNI组，大鼠右侧下肢行保留性神经损伤（spared nerve injury, SNI）手术；INPC组和INPC/hPPE组大鼠分别于SNI术后1周鞘内移植BrdU标记的永生化神经前体细胞INPC或转rAAV2/hPPE永生化神经前体细胞（INPC/hPPE）。持续观察大鼠行为学改变，分别于SNI术前、SNI术后1周至细胞移植后8周内每周测定各组大鼠50％机械缩爪阈值（mechanical withdrawal threshold, MWT）和热缩爪潜伏期（thermal withdrawal latency, TWL）。于细胞移植8周后取各组大鼠L4-6脊髓组织，应用免疫组织化学法检测移植细胞BrdU和L-EK的表达，采用RT-PCR和放射免疫法检测hPPE、L-EK的表达及分泌。 结果： SNI术后1周，大鼠出现疼痛行为学症状，MWT和TWL降低（P<0.05）；细胞移植后1周，INPC/hPPE组大鼠疼痛行为学症状明显减轻，MWT和TWL升高（P<0.05），到细胞移植后第3周，已基本恢复至正常水平。细胞移植后8周，INPC组和INPC/hPPE组大鼠脊髓背角软脑膜和脊髓浅层中均可检测到移植细胞BrdU染色，免疫细胞化学法、RT-PCR和放射免疫法结果均表明INPC/hPPE组hPPE的表达和L-EK的分泌高于其它四组（P<0.05）。 结论： 将携带rAAV2/hPPE的永生化神经前体细胞移植入SNI慢性神经病理性痛大鼠蛛网膜下腔，细胞可在脊髓组织中长期存活，并持续分泌高水平的L-EK，产生明显的镇痛效应，因此，建立表达外源基因的永生化神经前体细胞系是中枢神经细胞基因治疗的较为理想的选择。 |
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