目的　探讨吸入麻醉药乙醚，安氟醚、异氟醚和七氟醚催眠作用与阿片受体的关系。

       方法　建立小鼠催眠模型后,在小鼠催醒实验中,分别观察纳络酮对模型小鼠翻正反射消失持续时间。

       结果　纳络酮对上述4种吸入麻醉药的催眠、镇痛作用的影响均无显著性(p>0.05)。

       结论　阿片受体并非乙醚、安氟醚、异氟醚和七氟醚催眠作用的主要靶位。

       关键词　吸入麻醉药;催眠;纳络酮;阿片受体

　   尽管吸入全麻药在临床上已被广泛应用，对吸入麻醉药的作用机制也已经进行了长期深入的研究，并得出一定的结果， 但这些结果都有一定的局限性，因而其全麻机制仍不能确切阐明[1～2]。近年来，国内外许多实验室都应用克隆技术来研究吸入麻醉药的受体机制。其中甘氨酸、AMPA、GABAA、NMDA、5-HT等受体是当前研究的热点。但对阿片受体与吸入麻醉药的关系研究较少。本实验应用在体方法来探讨吸入麻醉药乙醚(diethyl ether)、安氟醚（enflurane）、异氟醚(isoflurane)和七氟醚(sevoflurane)的作用机制与阿片受体的关系。通过翻正反射实验观察阿片受体特异性拮抗剂纳络酮（naloxone）对吸入麻醉药催眠作用的影响来探讨吸入性麻醉药的催眠作用是否与阿片受体有关。
       1　材料和方法
       1.1　试剂与仪器　乙醚为徐州试剂厂生产，批号040203；安氟醚为意大利雅培制药有限公司生产，批号78184TL;异氟醚为山东力诺科峰制药有限公司生产，批号040801;七氟醚为江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号041231;纳络酮为北京四环医药科技有限公司生产，批号 0408081。
       1.2　动物及分组　昆明种小鼠,体重18～25ｇ，采用分层随机区组设计，使各小组小鼠平均体重相似，各组性别比例相同[3] ，徐州医学院实验动物中心,SCXK(苏)2002 0022。
       1.3　催醒实验（analeptic test）　小鼠80只，分为安氟醚(Eth)组、异氟醚(Iso)组、七氟醚(Sevo)组和乙醚(Eth)组四大组，每大组再分为生理盐水组和纳络酮两小组，即En-NX组、En-NS组，Iso-NX 组、Iso-NS组，Sevo-NX 组、Sevo-NS组和Eth-NX组、Eth-NS组，n=10。。调节室温在18～20℃。分别腹腔注射催眠剂量的乙醚（2.0mlkg-1），安氟醚(1.5mlkg-1)、异氟醚(1.0mlkg-1)和七氟醚(7.0mlkg-1),造成睡眠模型,待翻正反射消失后1min,实验组纳络酮4mgkg-1 (注基金项目:国家自然科学基金资助项目(39970715);江苏省自然科学基金资助课题(BK2001143) 
   

       射时间10s),对照组NS静注10mlkg-1 (注射时间10s)。记录从静注到翻正反射恢复的时间(recovery time of righting reflex,简称为睡眠时间,ST)。
       1.4 统计学处理　实验数据用 ｘ±s表示,单位分。每种麻醉药中纳络酮组与NS组比较,实验数据采用样品均值t检验,检验水准:α=0.05。

       2　结果
       结果表明,纳络酮不能缩短安氟醚、异氟醚和七氟醚麻醉小鼠的翻正反射消失持续时间。 实验组与对照组相比,小鼠睡眠时间的差异均无统计学意义(p>0.05)，见Tab1。

       讨论
       阿片受体分为四型，分布在痛觉传导区以及与情绪和行为相关的区域，集中分布在导水管周围灰质，内侧丘脑，杏仁核核脊髓罗氏胶质区等[7]。 吸入麻醉药的作用部位在脑和脊髓。纳络酮是阿片受体拮抗药，为羟二氢吗啡酮的衍生物，本身对阿片受体无激动效应，对µ受体有很强的亲和力，对κ受体核ð受体也有一定的亲和力。此药亲脂性很强，本易于透过血脑屏障。静脉注射后脑内血药浓度可达血浆浓度的4.6倍，静脉注射后2～3分钟可产生最大效应,作用持续时间约45分钟[4]。实验在建立良好的小鼠镇痛催眠模型的基础上,将纳络酮作为工具药,来研究吸入性麻醉药的催眠镇痛的机制是否与阿片受体有关。麻醉包括镇痛、催眠、意识消失、认知障碍、肌松、抑制异常应激反应等诸多作用，它们的机制并不相同。催眠作用是麻醉药诸多作用中基本、重要的作用。
       根据吸入麻醉药的体内过程及实验证实,吸入麻醉药经腹腔注射给药后同样能够达到催眠、镇痛的作用[5]。纳络酮临床有效剂量为0.4mg/50kg，本实验采用4mgkg-1，剂量已足够大,给药后对模型小鼠的睡眠无明显影响。说明阿片受体不是吸入性麻醉药的催眠作用的主要靶位。本实验研究为在体研究，难免同时受神经、体液、内分泌等诸多因素影响。催眠作用的产生及调控是涉及多部位多机制的复杂过程。中枢神经系统存在复杂的神经网络,乙醚，安氟醚、异氟醚和七氟醚全麻作用的机制涉及中枢神经系统的多个水平、多个部位和多种机制，尚需继续研究。
       参考文献
       1 winegar BD,Owen DF, Yost CF et al: volatile general anesthetics produce hypopolarization Aplysia neurons by activation of a discrete population of baseline potassium channel, Anesthesiology 85:889,1996

       2 Nishikawa K, Maciver MB. Excitatoty synaptic transmission mediated by NMDA receptors is more sensitive to isoflurane than nonNMDA receptor mediated responses. Anesthesiology, 2000,92:228 236.
       3宋必卫,徐叔云,马传庚ｅｔａｌ.镇痛药物实验法.见:徐叔云,卞如濂,陈　修主编.药理实验方法学,第3版,北京:人民卫生出版社,2002:882～7
       4 Donald D. Mechanism of action. Ronald D Miller，Anesthesia,Fifth edition ,Volume 1 :49.
       5 戴体俊,叶　妙,傅　英.注射挥发性麻醉药对动物的效应.临床麻醉学杂志,1997;13(5):262～3

                           Tab. 1 The Effects of naloxone on the analeptic test of model mice

                       Abstract
       The relationship between the hyponotic effects of volatile anesthetic and opioid receptor
       Obsjective:  To study the relationship between the analgesic effects of enflurane, isoflurane, sevoflurane and diethyl ether and opioid receptor.
       Methods:  After having established the mice model of hypnotics, we injected the mice with opioid receptor antagonist and observed changes of sleep time using awaken test.Result Naloxone had no distinctive effects to the four volatile anesthetics mentioned above (p>0.05).

       Conclusion:  Opioid receptor may not be the major target of enflurane, isoflurane, sevoflurane, diethyl ether.
       Key Words:  volatile anesthetic; hypnotic; naloxone; opioid receptor